张蒙夏,刘琪,吴海燕,李响,唐圣松.胞质M-CSF诱导HeLa细胞侵袭和迁移*[J].生物化学与生物物理进展(待发表)
胞质M-CSF诱导HeLa细胞侵袭和迁移*
Cytoplasmic M-CSF Induces Invasion and Migration of HeLa Cells*
投稿时间:2017-02-13  修订日期:2017-07-12
中文关键词:  巨噬细胞集落刺激因子,宫颈癌,基质金属蛋白酶-2,侵袭,迁移
英文关键词:macrophage  colony stimulating  factor, cervical  carcinoma, Matrix  metalloproteinase-2, invasion, migration
基金项目:湖南省高校创新平台开放基金项目(09K072,12K120),湖南省教育厅青年项目(11B110)
作者单位E-mail
张蒙夏 湖南中医药大学 jackiemo@126.com 
刘琪 南华大学  
吴海燕 南华大学  
李响 南华大学  
唐圣松 湖南医药学院 tangss_submit@163.com 
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中文摘要:
      为探讨巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对人宫颈癌细胞(HeLa细胞)侵袭和迁移的影响及机制,采用胞质定位空载体pCMV/cyto/myc与重组载体pCMV/cyto/myc-M-CSF稳定转染HeLa细胞株,建立稳定高表达胞质M-CSF的细胞系(HeLa-M细胞),经Transwell实验观察胞质M-CSF对HeLa细胞侵袭和迁移能力的影响,逆转录-聚合酶链式反应及Western blotting检测细胞Rho三磷酸鸟苷酶(Rho GTPases)及基质金属酶的表达,明胶酶谱法检测基质金属酶-2的活性. 结果显示,与转染空载体的HeLa细胞(HeLa-C细胞)和对照组HeLa细胞比较,胞质M-CSF的高表达可明显增强HeLa细胞在体外的侵袭和迁移能力,其机制与Rho GTPases的活化,以及MMP2表达上调及其活性增高密切相关。
英文摘要:
      In order to study the effects and mechanisms of macrophage colony stimulating factor (M-CSF) on invasion and migration in human cervical cancer cells (HeLa cell line),the empty vectors (pCMV/cyto/myc) and recombinant vectors (pCMV/cyto/myc-M-CSF) were transfected into HeLa cells to establish the stable cell line with high expression of cytoplasmic M-CSF (HeLa-M cells). Transwell tests were used to observe the effect of cytoplasmic M-CSF on the cell invasion and migration. MMP-2 activity was detected by gelatin zymography assay. The expression of mRNA and protein was measured by Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction and western blotting. The results showed that the high expression of cytoplasmic M-CSF significantly enhanced the ability of invasion and migration ability in HeLa cells, compared with the empty vector transfected HeLa cells (HeLa-C cells) and the control group (HeLa cells). Our findings suggested that the mechanisms were closely related to the expressions of Rho GTPases (Rac1、cdc42), and the increasing activity and expression of MMP2.
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